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細(xì)胞消化與解離試劑
在組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)的過程中,需要使用組織細(xì)胞消化與解離試劑使組織細(xì)胞得以解離和分散,以便進(jìn)行單個細(xì)胞懸液的制備或貼壁生長傳代細(xì)胞培養(yǎng)。常用的消化液有胰蛋白酶(Trypsin)-EDTA、膠原酶和分散酶等。NEST?提供多種效能不同的細(xì)胞消化液,以滿足您在原代細(xì)胞分離和貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)中的不同需求。
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胰蛋白酶(Trypsin)是一種絲氨酸水解酶,它能夠把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羥基側(cè)切段,水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì),破壞細(xì)胞間的連接,從而使組織或貼壁細(xì)胞離散成單個細(xì)胞。胰酶分散細(xì)胞的活性與組織或細(xì)胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時間有關(guān),在pH8.0和37°C時,胰酶的作用能力最強。因此,在使用胰酶時,應(yīng)當(dāng)把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。一般常用胰酶的工作濃度為0.25%,而半貼壁細(xì)胞或?qū)σ让该舾械募?xì)胞常采用低濃度(0.05%)的胰酶進(jìn)行細(xì)胞消化。由于EDTA能夠螯合Ca2+和Mg2+,從而破壞細(xì)胞連接促進(jìn)細(xì)胞的解離,因此在胰酶溶液中常常會加入一定量的EDTA混合使用,以增強解離效果。對于EDTA可能會干擾后續(xù)的測試分析時,推薦選擇不含EDTA的消化液。具體請參考以下表格選擇合適的胰蛋白酶產(chǎn)品。
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0.25% Trypsin-no EDTA,無酚紅
更新日期:2023-09-04
0.25% Trypsin-no EDTA,無酚紅
更新日期:2023-09-04
0.25% Trypsin-no EDTA,無酚紅
更新日期:2023-09-04
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解決方案 | 293T細(xì)胞培養(yǎng)攻略
2023-08-09
293T細(xì)胞是一種常見的哺乳動物細(xì)胞系,在被用作逆轉(zhuǎn)錄病毒的生產(chǎn)時會產(chǎn)生高滴度的病毒。
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