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01.細(xì)胞貼壁能力比較弱

02.細(xì)胞本身偏嗜酸性，培養(yǎng)基消耗較快

03.細(xì)胞生長時聚集成島

04.細(xì)胞聚集成團(tuán)之后很難再吹散

01.細(xì)胞凍存

02.細(xì)胞傳代

03.細(xì)胞復(fù)蘇

01.細(xì)胞密度如何計算

02.培養(yǎng)過程中細(xì)胞碎片較多

• 細(xì)胞內(nèi)的黑色顆粒是細(xì)胞外分泌泡以及細(xì)胞器的折光，這個屬于細(xì)胞自身特性，無法清除也無法改變。而細(xì)胞對培養(yǎng)環(huán)境不適應(yīng)、缺乏營養(yǎng)、滲透壓有異常等均可能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)顆粒增加，建議適當(dāng)改變培養(yǎng)條件。
• 細(xì)胞外的黑色顆粒為細(xì)胞碎片和細(xì)胞代謝產(chǎn)物，需要先舍棄原有培養(yǎng)基后用PBS潤洗清除細(xì)胞碎片，加入新的培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)。
  如果潤洗無法清除細(xì)胞碎片，可以等細(xì)胞密度處在70-80%左右時消化處理細(xì)胞，終止消化之后混勻細(xì)胞，收集細(xì)胞懸液在900-1000rpm條件下離心3分鐘，舍棄上清液。重懸細(xì)胞→離心→再重懸后將細(xì)胞懸液接種到新的培養(yǎng)瓶。
  第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果碎片很多，建議用PBS多次潤洗細(xì)胞。

03.細(xì)胞出現(xiàn)聚團(tuán)現(xiàn)象

• 細(xì)胞傳代過程中需要盡可能地吹散細(xì)胞，并在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞基本分散后再把細(xì)胞接種到培養(yǎng)瓶中。
• 優(yōu)質(zhì)的培養(yǎng)體系能有效避免細(xì)胞吹散后在貼壁時再聚團(tuán)的現(xiàn)象， 也可以減輕細(xì)胞聚團(tuán)后無法重新攤開生長的癥狀。
• 培養(yǎng)過程中輕微聚團(tuán)可以稍微延長消化時間，讓大團(tuán)細(xì)胞塊下沉后吸取上層的分散細(xì)胞進(jìn)行傳代。若聚團(tuán)過于嚴(yán)重建議重新培養(yǎng)或者更換培養(yǎng)體系。